聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-SSCP)是一種快速、簡便、較靈敏的檢測基因變異的方法,但其影響因素很多,本文對凝膠濃度、上樣量、PCR產(chǎn)物稀釋倍數(shù)、甘油濃度、電壓、電泳溫度幾個(gè)重要的因素進(jìn)行探討.。其基本原理是對已知有基因點(diǎn)突變的遺傳病，在其突變位點(diǎn)附近設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增的產(chǎn)物取出一部分（一般為1pl），變性后在不含變性劑的中性聚丙烯酰胺凝膠中電泳，由于單鏈DNA中堿基配對或聚集，當(dāng)溫度或變性劑等環(huán)境改變會引起不同的構(gòu)象

方法:通過應(yīng)用PCR-SSCP方法結(jié)合核苷酸序列分析檢測成都漢族群體98個(gè)個(gè)體人類補(bǔ)體第8成分(C8A)基因型頻率分布.結(jié)果:凝膠濃度為8%,PCR產(chǎn)物稀釋4倍,上樣量為4μl,不加甘油,電壓為200V,恒溫電泳時(shí),SSCP分析可得到滿意的結(jié)果.結(jié)論:PCR-SSCP分析對不同的研究對象,其分析參數(shù)不同,需要對其分析條件進(jìn)行最大優(yōu)化,才能獲得實(shí)驗(yàn)的成功.