原代培養(yǎng)時,如果上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞為分區(qū)成片混雜生長,每種細(xì)胞都以小片或區(qū)域性分布的方式生長在瓶壁上??刹捎脵C械的方法去除不需要的細(xì)胞區(qū)域而保留需要的細(xì)胞區(qū)域,其方法如下:
(1)將要純化細(xì)胞的培養(yǎng)瓶,在凈化室內(nèi)放在倒置顯微鏡監(jiān)視下進(jìn)行。
(2)用硅橡皮刮子在不需要生長的細(xì)胞區(qū)域推劃,使細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)液中,注意不要傷及所需細(xì)胞。
(3)推劃后用培養(yǎng)液沖洗振搖兩次倒掉,即可將培養(yǎng)基加入原瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
(4)數(shù)日后如發(fā)現(xiàn)不需要的細(xì)胞又長出,可再進(jìn)行上述操作,這樣反復(fù)多次可以純化細(xì)胞。操作過程中要嚴(yán)格無菌操作,防止污染。