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豬肺泡巨噬細胞說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　豬肺泡巨噬細胞說明書
種屬:3D4/21

類型:貼壁生長

形態(tài):巨噬細胞樣

分離基物肺泡巨噬細胞；SV40轉(zhuǎn)化；Landrace

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級:2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

傳代方法:60mm培養(yǎng)皿，1ml 0.25%胰酶常溫下消化時間5-6分鐘。

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是豬肺泡巨噬細胞說明書的相關熱銷產(chǎn)品：
BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸萬古霉素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Vancomycin HCl

C57BL/6小鼠胚胎干細胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells凡德他尼質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細胞培養(yǎng)Vandetanib

Hp2/o細胞，人跟細胞 赭曲霉 人胚;HFL-I海帶多糖；昆布糖 (來自褐藻類)質(zhì)量規(guī)格：BR，日本進口分裝Laminarin from Laminaria digitata

SW 1990(人*癌細胞) 5×106cells/瓶×2胰酶(1:250)，胰酶粉質(zhì)量規(guī)格：酶活1:250,BRPancreatin

HGC-27(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記) 人臍內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C木瓜蛋白酶(800u/mg)質(zhì)量規(guī)格：800u/mgPapain
CEM/C1(人急性細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 人髓核細胞HNPC腺苷 5‘-（α,β-亞甲基）二1酸鹽，鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Adenosine 5'-(α,β-methylene)diphosphate,  salt

主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml) 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N6-苯甲?；佘?/span> 質(zhì)量規(guī)格：美國進口N6-Benzoyl-5'-O-DMT-adenosine

AK4 Others Human 人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 8-疊氮腺苷質(zhì)量規(guī)格：美國進口8-Azido Adenosine 

中國倉鼠卵巢細胞系;pDSr a2-mpl-X2-肼基腺苷質(zhì)量規(guī)格：美國進口2-Hydrazino Adenosine

Mo-MuLv/3T3細胞，Mo-MuLv感染的3T3細胞 人*癌細胞,SFPAC-1細胞 CM-M056小鼠腎實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基100mL腺苷3',5'-環(huán)單1酸鹽，N6-苯甲酰-鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphate, N6-Benzoyl-,  Salt
ST6GAL1 Others Mouse 小鼠 ST6GAL1 / CD75 人細胞裂解液 (陽性對照) 間本二酸二1酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃5毫升

HEL(懸浮) 紅白細胞細胞甲基-β-環(huán)糊精 Methyl-β-cyclodextrin 128446-36-6 1G 通用試劑

HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 HEC-1-A human endomeial adenocarcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS啊利新藍 Ingrcin Bluq 1 33864-99-

TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標簽)DEAE纖維素DE-23shēng huà shì jì容量：5毫升

大鼠海馬趾神經(jīng)細胞(RHh)(1×106) WM451, 人色素瘤細胞 Human15067-26-2氘代苊ACEnepxtxene-D10
豬肺泡巨噬細胞說明書PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟米龍醋酸酯Fluorometholone Acetate質(zhì)量規(guī)格：>97%

狗骨髓間質(zhì)干細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells十溴二苯Pentabromophenyl ether質(zhì)量規(guī)格：>98%

HME7細胞，人色素瘤細胞 短雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;HH-29氨基雜環(huán)鹽酸鹽3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane 質(zhì)量規(guī)格：>98%

UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2春雷霉素;春日霉素; 克死霉Kasugamycin質(zhì)量規(guī)格：>60%,BR

HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人*癌細胞 人癌細胞;MDA-MB-435S土拉霉素A，托拉菌素A,泰拉霉素Tulathromycin A質(zhì)量規(guī)格：>95%
收到豬肺泡巨噬細胞說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。