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資源名稱　人皮膚鱗癌細(xì)胞
種屬：SCL-1

類型：貼壁

分離基物：皮膚鱗癌；女性

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：H-DMEM，90%；FBS，10%；雙抗

生長條件：Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存儲條件：92%完全培養(yǎng)基：+8%DMSO

培養(yǎng)操作步驟：
人皮膚鱗癌細(xì)胞廠家產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
大鼠成纖維細(xì)胞RLF紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定Erythromycin

NP Others SARS SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸多巴酚丁胺質(zhì)量規(guī)格：BR，細(xì)胞培養(yǎng)級，度大于99%，USP29Dobutamine HCL

團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF依托度酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Etodolac

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 細(xì)胞，QGY-7703細(xì)胞 ST2/o細(xì)胞，小鼠雜交瘤細(xì)胞依托孕1質(zhì)量規(guī)格：>98%Etonogestrel

MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞 Human依維莫司質(zhì)量規(guī)格：>95%,mTOR抑制劑,BREverolimus;RAD001
Hepa 1-6, 小鼠細(xì)胞 細(xì)胞,RCC-krause細(xì)胞 SK-HEP-1(細(xì)胞)1酸氫鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定Calcium hydrogenphosphate dihydrate

小鼠紅細(xì)胞;MEL磺胺二甲嘧啶 （標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Sulfamethazine

MMP9 Others Human 人 MMP-9 / CLG4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 磺胺脒（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Sulfaguanidine

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21芬布芬（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Fenbufen

HA Others Influenza B 乙型 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯磺隆質(zhì)量規(guī)格：>93%,BRChlorosulfuron
NHEK.f-c 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年，單一來源 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1mlDIPEAN，N-二異基10克CP

人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞cDNAHN-h cDNA2′-脫氧胸苷-5′-... Thymidine 5′-triphosphate  salt... 18423-43-3 100MG 通用試劑

PRKAR1A Others Human 人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 六基二硅迷;六基氧二硅烷;六基二硅氧烷 HqxcMqthyldisiloxcnq;HMDSO 107-46-0

T739小鼠肺腺株;LA795CITRICACID,AMMONIUMSALT,DIBASIC檸檬酸氫二超級白色精細(xì)顆粒粉末RTsigma

HCCC-9810細(xì)胞，人亞力山大細(xì)胞 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,7WCY1.0細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-HCV-E2589-18-4對甲基4-metxylbenzyl alcohol
人皮膚鱗癌細(xì)胞廠家人小腦顆粒細(xì)胞cDNAHCGC cDNA硫酸壯觀霉素四水化合物Spectinomycin sulfate tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CDH1 Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 坦索羅辛tamsulosin質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Ana-1 小鼠巨噬細(xì)胞(S)-坦索羅辛鹽酸鹽(S)-Tamsulosin 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CL-0198RM-1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2替米沙坦-d3Telmisartan-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞替米沙坦?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸-d3Telmisartan-d3 Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線