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人直腸腺癌細胞（低分化）培養(yǎng)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研

資源名稱　人直腸腺癌細胞（低分化）
種屬：HR8348

類型：貼壁

分離基物：直腸腺癌；男性

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：1640，90%；FBS，10%；雙抗

生長條件：Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存儲條件：Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%（for reference） Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

培養(yǎng)操作步驟：
人直腸腺癌細胞（低分化）培養(yǎng)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
P388 小鼠細胞羥基脲-15NHydroxyurea-15N質(zhì)量規(guī)格：美國進口

SEMA4A Others Human 人 Semaphorin-4A / SEMA4A / Semaphorin-B 人細胞裂解液 (陽性對照) BW B70CBW B70C質(zhì)量規(guī)格：美國進口

非洲綠猴腎細胞;BS-C-1(S)-(-)-氨魯米特(S)-(-)-Aminoglutethimide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人骨骼肌成肌細胞(HSkMM)(5×105)(R)-(+)-氨魯米特(R)-(+)-Aminoglutethimide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CL-0227T-24(人細胞)5×106cells/瓶×2S-(-)-氨魯米特L-1酸鹽S-(-)-Aminoglutethimide L-Tartrate Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口
IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白L-甲硫氨酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品L-Mine

NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 A10(大鼠主動脈平滑肌細胞)L-甲硫氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Mine

CL-0326Caki-2(人腎透明細胞癌細胞)5×106cells/瓶×2L-胱氨酸質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品L-Cystine

CD36 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD36 / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRH-Phe-OEt.HCl

人真皮成纖維細胞-新生兒總RNAHDF-n NA甘氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGlycine ethyl ester
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY1022 人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-6-(δ2-異戊1基)-腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-6-(δ2-Isopentenyl)-adenine

人小膠質(zhì)細胞總RNAHM NA9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進口9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine

CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 (陽性對照) 紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口EHNA

人真皮上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-氟腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進口2-Fluoroadenine

COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細胞) 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G62-(4-tert-丁苯基)嘧啶(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)2-(4-tert-Butylphenyl)pyridine
人直腸腺癌細胞（低分化）培養(yǎng)Hepa 1-6 小鼠細胞咪喹莫特Imiquimod質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照) 咪喹莫特（標準品）Imiquimod質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

人羊膜細胞;WISH伊立替康Irinotecan質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

TNFRSF4 Others Mouse 小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 人細胞裂解液 (陽性對照) 伊立替康(標準品)Irinotecan質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

HeLa 229 人細胞鹽酸伊立替康,(CPT-11)Irinotecan HCl Trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,三水合物
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線