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C57小鼠瘤株 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　C57小鼠瘤株
種屬：ME（Me）

形態(tài)：實體瘤

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：-

傳代方法：制備成細胞懸液接種至C57BL/6小鼠。

生長特性：體內生長

存儲條件：基礎培養(yǎng)基：+5%DMSO+20%FBS
細胞分類：
第一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
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敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1 豬髖動脈內皮細胞，PIEC細胞 CRL-1548細胞，大鼠細胞5-硝基尿嘧啶(>99.0%(HPLC)(T))5-Nitrouracil質量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T)

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CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿托伐他汀內酯Atorvastatin Lactone質量規(guī)格：美國進口

荷蘭白花奶牛牛肺細胞;DCL1阿托伐他汀 酰基-β-D-葡萄糖醛酸苷 70%, 含 30% 內酯Atorvastatin Acyl-β-D-glucuronide 70%, contains up to 30% lactone質量規(guī)格：美國進口
NCI-H1703(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PA317(成纖維細胞)心鈉素Ⅲ，大鼠質量規(guī)格：>95%,BRAtriopeptin III (rat)

組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml帶3蛋白質（547-553），人質量規(guī)格：>95%,BRBand 3 Protein (547-553)(human)

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HMC細胞，人腎小球系膜細胞 產EBV的絨猴白細胞,B95-8細胞 CL-0218SPC-A-1(人細胞)5×106cells/瓶×2心得安乙二醇質量規(guī)格：美國進口Propranolol glycol
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骨髓間質干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells煌綠乳糖膽鹽肉湯 Brillicnt Grqqn Lcctosq Bilq Broth

HME1細胞，人色素瘤細胞 長雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B細胞;Mao3,3',5,5'-四甲基聯(lián)... 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine HCl (≥... 207738-08-7 100MG 染色劑

U14-GFP(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2D-Asparticaciddimetxylesterxy7nochlorideD-天門冬酸10克BR，98%

HuH-6(人肝母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RBE, 人肝細胞 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0906L-Malicacid 10g/25g/100g/500g原裝 Sigma M1000
C57小鼠瘤株 大鼠頜下腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL羥基脫氫硝苯地平羧酸鹽Hydroxydehydro Nifedipine Carboxylate質量規(guī)格：美國進口

MCA38小鼠細胞 MCA38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS尼莫地平-d7Nimodipine-d7質量規(guī)格：美國進口

NRG4 Protein Human 重組人 NRG4 蛋白奧洛他定N氧化物Olopatadine N-Oxide質量規(guī)格：美國進口

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少突膠質前體分化生長添加物OPCDS外消旋去乙基奧昔布寧鹽酸鹽rac Desethyl Oxybutynin 質量規(guī)格：美國進口
收到C57小鼠瘤株 處理方法
產品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。