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細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)
種屬：T24

形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS　

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化生長添加物MODS杯[6]芳烴(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-叔丁基杯[6]芳烴(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

人牙周膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫雜杯[4]芳烴(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(HPLC)

T6-Swiss albino細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 B16(小鼠色素瘤細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫雜[4]芳烴鈉鹽(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene  Salt質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
PLC/PRF/5(人亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細(xì)胞)Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯質(zhì)量規(guī)格：0.98Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl ester

CL-0236U-2 OS(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRFmoc-β-homoaspartic acid

IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯質(zhì)量規(guī)格：0.98Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester

人肺動脈成纖維細(xì)胞cDNAHPAF cDNA高精氨酸質(zhì)量規(guī)格：98%，BR，L型H-HomoArg-OH

HCC38細(xì)胞，人導(dǎo)管癌細(xì)胞 昆蟲細(xì)胞系,SF-9細(xì)胞 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-D-纈氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-D-Val-OH
人*上皮細(xì)胞HREpiC4-羥基心得安β-D-葡萄糖苷酸 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S(-)-鹽酸心得安質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口S(-)-Propranolol ? HCl

IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞雷洛昔芬-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Raloxifene-d4

CM-H115人腦動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Raloxifene 6-Glucuronide

U266B1 [U266], 人細(xì)胞(+)-兒茶素水合物質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分(+)-Catechin hydrate
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)輸尿管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTEBOC-L-絲氨酸甲酯Boc-Ser-OMe質(zhì)量規(guī)格：BR

PG49細(xì)胞，人系 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞,ZA1細(xì)胞 CL-0042BxPC-3(人原位*腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine質(zhì)量規(guī)格：0.98

SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-蘇氨酸Boc-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR