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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基:+5%DMSO+20%FBS |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3678 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
大鼠腦細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:
資源名稱 大鼠腦細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:C6
形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:F10:Ham'sF10NutrientMixture2.5%FBS+15%HS
傳代方法:1:2~1:3傳代;2~3天換液1次。
生長特性:貼壁生長
存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基:+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程:
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是大鼠腦細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
NCI-H292(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23,4,5,6-四氯熒光素3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格:熒光染料
Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml赤蘚紅B(>95.0%(E))Erythrosine B質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(E)
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-acf-prf4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))4-n-Octyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))4-Octadecyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM05014-丙氧基苯(>97.0%(GC))4-Propoxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標(biāo)簽)米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Minoxidil
人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2 人肺動脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL7-羥基-4-甲基(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品7-Hydroxy-4-methylcoumarin
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D27-羥基-4-甲基質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR7-Hydroxy-4-methylcoumarin
LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十一酸睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Testosterone undecanoate
人*星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰香蘭素(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRo-Vanillin
人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]核黃素-5-嶙酸鈉鹽二水物,英文名或英文縮寫:FMN-Na,級別:ACS,98%,規(guī)格:5克
ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,7,4’-三羌基皇同(-20℃) cpigqnin 20-36-2
CL-0310VE(人內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水*白色薄片RTsigma
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 人單核細(xì)胞型瘤,THP1細(xì)胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母細(xì)胞)錄亞明T,英文名或英文縮寫:Chloramine T trihydrate,級別:超,99%,規(guī)格:100毫克
綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞;MGC803-GFPAgarose,TypeA 100g Spannish原裝
大鼠腦細(xì)胞培養(yǎng)ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)頭孢克1(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefixime質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 咪草煙Imazethapyr質(zhì)量規(guī)格:>98%
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)O-去甲文拉法辛(R型)R-(-)-O-Desmethyl Venlaine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) O-去甲文拉法辛(S型)S-(+)-O-Desmethyl Venlaine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美沙坦Olmesartan質(zhì)量規(guī)格:>99%
收到大鼠腦細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。