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資源名稱　tTA基因修飾的小鼠睪丸（B類）
種屬：F9-CAG-tTA-1A3

形態(tài)：多角

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS+1.0ug/mlpuromycin

生長特性：貼壁生長
tTA基因修飾的小鼠睪丸（B類）說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

培養(yǎng)操作步驟：
tTA基因修飾的小鼠睪丸（B類）說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產品：
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I 瘤細胞，EL4. IL-2細胞 K6H6/B5細胞，鼠雜交細胞3-羥基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide質量規(guī)格：美國進口

人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]奧司他韋酸-d3 Oseltamivir-d3 Acid質量規(guī)格：美國進口

MSR1 Others Mouse 小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-氯咪唑并[1,2-b]噠嗪6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine 質量規(guī)格：>98%

成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1酸腺嘌呤，維生素B4Adenine phosphate 質量規(guī)格：>98%,BR

GLA Others Mouse 小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 人細胞裂解液 (陽性對照)  Hypoxanthine質量規(guī)格：>98%,BR
S100B Others Human 人 S100B 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸小檗堿(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Berberine

CL-00074T1(小鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2京尼平苷酸質量規(guī)格：HPLC≥98%Geniposidic acid

EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 京尼平苷酸(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Geniposidic acid

小鼠細胞完全培養(yǎng)基 100mL原兒茶酸(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品3,4-Dihydroxybenzoic acid

TM3小鼠間質細胞 TM3 mouse Leydig cells D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO)+5%馬血清+2.5%FBS鹽酸戊乙奎（標準品）質量規(guī)格：含量測定Penehyclidine
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]組蛋白H1(小牛胸腺)5克

PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2-基-1,3-本二安 2,6-DicMinotoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMino-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdicMinq; 83-40-2

小鼠皮層神經(jīng)膠質細胞(EGFP標記)尿苷二嶙酸葡萄糖5克

3T6細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 人細胞,gpc-1細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg腎上腺酮1克RT

恒河猴腎細胞;RM-316373-93-62-脫氧腺苷一水合物 ≥99%2'-Deoxyadenosine monohydrate
tTA基因修飾的小鼠睪丸（B類）說明書小鼠骨髓細胞;FDC-P1 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞完全培養(yǎng)基 100mL腺苷-5'-三1酸酯二鈉鹽Adenosine 5'-triphosphate (ATP) di salt hydrate 質量規(guī)格：美國進口

PATU-8988/FU 人*癌尿嘧啶耐藥腺苷 2′(3′)-單1酸混合異構體 Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers 質量規(guī)格：美國進口

SEMA6A Others Human 人 Semaphorin-6A / SEMA6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷5'-二1酸核糖鈉Adenosine 5'-diphosphoribose  salt 質量規(guī)格：美國進口

團頭魴尾鰭細胞;WCF8-疊氮-環(huán)二1酸腺苷-核糖8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose 質量規(guī)格：美國進口

LIFR Others Rat 大鼠 LIFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 8-氨基腺嘌呤核苷8-Amino Adenosine 質量規(guī)格：美國進口