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冷凍保存細(xì)胞之方法？
人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Endothelial Cell Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Endothelial Cell Derivatives說(shuō)明書(shū)！

人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Endothelial Cell Derivatives

     人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取的，人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞從正常人腹膜組織制備。正常人腹膜組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Endothelial Cell Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

LLC-MK2細(xì)胞，恒河猴腎細(xì)胞 人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-E6細(xì)胞 CM-H117人腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸鉀（標(biāo)準(zhǔn)品）Potassium Sorbate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK甲磺酸倍他司?。?biāo)準(zhǔn)品）Betahistine mesylate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡醛內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Glucurolactone質(zhì)量規(guī)格：檢查

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞MM反鉑transplatin 質(zhì)量規(guī)格：>95%

FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 草酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Oxalic acid質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

人細(xì)胞;NCI-H1650氟達(dá)拉賓Fludarabine質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氨魯米特（標(biāo)準(zhǔn)品）Aminoglutethimide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

MDA-MB-435 人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞氟他胺Flutamide質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP29

Calu-6人退行性癌細(xì)胞 Calu-6 human degenerative cancer cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS氟他胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Flutamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白環(huán)磷酰胺Cyclophosphamide質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水合物USP,BR

TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SK-HEP-1(人細(xì)胞)D-酒石酸(>99%，BC)質(zhì)量規(guī)格：>99%，BCD-Tartaric acid hydrate

CM-M028小鼠食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL吲哚(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRIndole

LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III)

球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基OsM(S)-(+)-1,1'-聯(lián)萘基-2,2'-雙磷酸氫酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)(S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate

RL95-2細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素),AtT-20細(xì)胞 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)(R,R)-(-)-2,3-Butanediol

人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Endothelial Cell DerivativesHCC 94[HCC941122]細(xì)胞，子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) 人低分化細(xì)胞,SGC7901細(xì)胞 豬腎細(xì)胞;PK(15)葉酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Folic acid

tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1葉酸質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRFolic acid

DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 托法替尼;CP-690550質(zhì)量規(guī)格：>98%，JAK3抑制劑Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib)

人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA1-萘乙酸(NAA)；α-萘乙酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,Suitable for plant cell culture1-Naphthylacetic acid

SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-乙基-d5-腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3-Ethyl-d5-adenine

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。