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抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體費(fèi)用 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選最適條件；

3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：
英文名稱  Anti-Phospho-PPIG (Ser376) 

中文名稱   磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體費(fèi)用 

別    名  CARS cyclophilin; CARS Cyp; CASP 10; CASP10; Clk associating RS cyclophilin; Cyclophilin G; CyclophilinG; CYP; MGC133241; Peptidyl prolyl cis trans isomerase G; Peptidyl prolyl isomerase G; Peptidylprolyl isomerase G (cyclophilin G); Peptidylprolyl isomerase G; PPIase G; Rotamase G; RotamaseG; PPIG_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/100μg

抗體來(lái)源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep 

產(chǎn)品類型   一抗 磷酸化抗體  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 89kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PPIG around the phosphorylation site of Ser376 [VS(p-S)GE] 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體費(fèi)用 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 PPIG belongs to the the peptidyl-prolyl cis/trans isomerase protein family (PPIases). PPIases accelerate the folding of proteins. PPIG catalyzes the cis-trans isomerization of proline imidic peptide bonds in oligopeptides and is implicated in the folding, transport, and assembly of proteins. It is distributed in nuclear speckles, a nuclear compartment rich in splicing factors, and colocalizes with the splicing factors SC35 and pinin, suggesting a role in the regulation of pre-mRNA splicing.

Function : PPIases accelerate the folding of proteins. It catalyzes the cis-trans isomerization of proline imidic peptide bonds in oligopeptides. May be implicated in the folding, transport, and assembly of proteins. May play an important role in the regulation of pre-mRNA splicing.

Subunit : Interacts with CLK1, PNN and with the phosphorylated C-terminal domain of RNA polymerase II.

Subcellular Location : Nucleus matrix. Nucleus speckle. Note=Colocalizes with RNA splicing factors at nuclear speckles.

Post-translational modifications : Phosphorylated upon DNA damage, probably by ATM or ATR.

Similarity : Contains 1 PPIase cyclophilin-type domain.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q13427.2

肽基脯氨?；?lè)串悩?gòu)酶，廣泛存在于各種組織和器官。根據(jù)對(duì)劑的敏感性，分屬三個(gè)獨(dú)立的家族：親環(huán)蛋白PPIG、FK506結(jié)合蛋白和細(xì)蛋白。能夠加速自身折疊和體內(nèi)新生肽鏈折疊及變性蛋白質(zhì)的體外折疊，主要分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。

抗體的鑒定：

1）磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體費(fèi)用 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti- Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人磷酸化癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-GFAP/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CKS1 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基1抗體 規(guī)格 0.2ml

pre S1/S2 protein [HBV] pre S1/pre S2(抗原) 0.5mg

IFI35 英文名稱： 干擾素誘導(dǎo)35蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh TREML1/TLT1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-GFAP/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Deltex-1/FITC 熒光素標(biāo)記Deltex-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Cadherin like 23 鈣粘蛋白23抗體 規(guī)格 0.2ml

Collagen V (Anti--Collagen Type V ) Ⅴ型膠原(多肽) 0.5mg

phospho-HSP70(Tyr41) 英文名稱： 磷酸化熱休克蛋白70抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh SEPT14 細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit 人toll樣受體2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-rat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

TSGF(Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA Kit 人特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子 96T

Phospho-NMDAR2B (Ser1303) 英文名稱： 磷酸化谷酸受體2B抗體 0.1ml

BASP1 英文名稱： 腦富含膜附著信號(hào)蛋白1抗體 0.2ml

Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素裂解物HELM-l L

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE 人細(xì)胞，SW579細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞，小鼠β瘤細(xì)胞

人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1

EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ACY1 Others Human 人 ACY1 / Aminoacylase-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞裂解物HEKL

HT-3細(xì)胞，人子細(xì)胞 人腎小球髓母細(xì)胞,HBZY-1細(xì)胞 軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

兔腎細(xì)胞;RK-13

SOST Others Human 人 SOST / Sclerostin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體費(fèi)用 HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人微內(nèi)皮細(xì)胞HCoMEC

KMB 人胚肺成纖維樣細(xì)胞

CM-H091人大隱內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤

人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL