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抗體的生物素化標(biāo)記實驗要點：

1. 磷酸化蛋白激酶C亞性抗體規(guī)格 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-Phospho-PRKACB(Thr198) 

中文名稱   磷酸化蛋白激酶C亞性抗體規(guī)格 

別    名  Phospho-PKA alpha + beta(Thr198); C alpha; cAMP dependent protein kinase beta catalytic subunit; cAMP dependent protein kinase alpha catalytic subunit; cAMP dependent protein kinase catalytic subunit alpha; cAMP dependent protein kinase catalytic subunit beta; Cs; PKA; PKA C; PKA C alpha; PKA C beta; PKACA; PKACB; PRKACA; PRKACB; Protein kinase cAMP dependent catalytic alpha; Protein kinase cAMP dependent catalytic beta; Protein kinase cAMP dependent catalytic beta isoform a; Protein kinase cAMP dependent catalytic beta isoform b.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.1ml/100μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow 

產(chǎn)品類型   一抗 磷酸化抗體  

研究領(lǐng)域     免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶

蛋白分子量  predicted molecular weight: 42kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PRKACB around the phosphorylation site of Thr198 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

磷酸化蛋白激酶C亞性抗體規(guī)格 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 PRKACA and PRKACB are members of the Ser/Thr protein kinase family and are a catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase. cAMP is a signaling molecule important for a variety of cellular functions. cAMP exerts its effects by activating the cAMP-dependent protein kinase, which transduces the signal through phosphorylation of different target proteins. The inactive kinase holoenzyme is a tetramer composed of two regulatory and two catalytic subunits. cAMP causes the dissociation of the inactive holoenzyme into a dimer of regulatory subunits bound to four cAMP and two free monomeric catalytic subunits.

PKA alpha + beta (catalytic subunits) (phospho Thr198)

抗體的鑒定：

1）磷酸化蛋白激酶C亞性抗體規(guī)格 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。

IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT 人白介素12Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GPR109A/HM74A G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Monoacylglycerol Lipase 單酰甘油脂肪酶抗體 規(guī)格 0.2ml

UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人 96T

RSRC2 英文名稱： 蛋白抗體 0.2ml

Phospho-c-Kit(Tyr721) 英文名稱： 磷酸化原癌基因c-kit抗體 0.1ml

Anti-GPR109A/HM74A G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-BSEP 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDZD8 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

CD20 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

TSARG3 英文名稱： 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體 0.1ml

CD46/MCP 英文名稱： 膜輔蛋白抗體 0.2ml

Anti-BSEP 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

anti-AQP1/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM3A *衍生因子抗體 規(guī)格 0.1ml

sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 96T

Phospho-MAP3K8 (Ser400) 英文名稱： 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml

ALDH2 英文名稱： 乙醛脫氫酶2抗體 0.1ml

anti-AQP1/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

正常細(xì)胞

CAM191 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 (aa 1-208) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0094HCC827(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長裂解物HOPC-os L

人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;293 Ad5 人臍內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素裂解物HELM-l L

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE 人細(xì)胞，SW579細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞，小鼠β瘤細(xì)胞

人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1

EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

磷酸化蛋白激酶C亞性抗體規(guī)格 正常細(xì)胞

CAM191 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 (aa 1-208) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0094HCC827(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長裂解物HOPC-os L

人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;293 Ad5 人臍內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL