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NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞)貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)

發(fā)表時(shí)間:2023-02-28
NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞)貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):
1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。
2. 加入1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過(guò)程大約需要3至5分鐘(此處為12.5 cm2培養(yǎng)瓶所用體積,可根據(jù)實(shí)際情況增減用量)。
3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落,并使細(xì)胞分散。
4. 離心200x g/5 min,去除上清后,取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中,并加入新鮮細(xì)胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。
5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代比例:建議 1:6 至 1:9

培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。

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Alpha B Crystallin α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體
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